怎樣自制凝膠?
1、制備1%瓊脂糖凝膠(大膠用70ml,小膠用50ml):稱取0.7 g(0.5 g)瓊脂糖置於錐形瓶中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小燒杯.微波爐加熱煮沸3次至瓊脂糖全部融化,搖勻,即成1.0%瓊脂糖凝膠液。
2、膠板制備:取電泳槽內的有機玻璃內槽(制膠槽)洗幹凈,晾幹,放入制膠玻璃板.取透明膠帶將玻璃板與內槽兩端邊緣封好,形成模子.將內槽置於水平位置,並在固定位置放好梳子.將冷卻到65℃左右的瓊脂糖凝膠液混勻小心地倒入內槽玻璃板上,使膠液緩慢展開,直到整個玻璃板表面形成均勻膠層。
3、室溫下靜置直至凝膠完全凝固,垂直輕拔梳子,取下膠帶,將凝膠及內槽放入電泳槽中。添加1×TAE電泳緩沖液至沒過膠板為止。
擴展資料:
儲藏溫度:常溫
商品名很多,常見的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美國Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網狀結構,網狀結構的疏密依靠瓊脂糖的濃度。壹般情況下,它的結構是穩定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9範圍內的鹽溶液)。
瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學滅菌活處理。
瓊脂糖 Agarose,縮寫為AG,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學結構由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構成.
把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶於熱水,冷卻制成的凝膠。制成的小顆粒用於凝膠過濾。適於用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。
利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內沈降反應的支持物。
參考資料:
百度百科-瓊脂糖凝膠