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離子交換色譜中為什麽要用氯離子洗脫陰離子?

離子交換色譜中為什麽要用氯離子洗脫陰離子?

陰離子交換柱的填料是帶正電荷的填料,在低鹽條件下通過電荷相互作用吸附樣品中的陰離子和帶負電荷的物質(如DNA)。這些帶負電的物質由於電荷和分子大小不同,與帶正電的填料的結合力也不同。梯度氯離子(壹般是氯化鈉梯度,例如當氯化鈉線性梯度從100mM增加到1M),氯離子會與結合物質競爭結合帶正電荷的填料。隨著氯離子濃度的增加,氯離子的競爭會越來越強,與填料結合的物質會由弱到強洗脫,以形成獨立的洗脫峰,從而將這些物質分離。

陽離子交換柱正好相反,柱填料帶負電,結合的帶正電的物質用鈉離子洗脫。