為什麽選擇血清蛋白區帶電泳檢測M蛋白？
壹、M蛋白的基礎知識
m蛋白是漿細胞或B淋巴細胞大量增殖時產生的異常免疫球蛋白。它的氨基酸組成和排列順序非常均勻，空間構象和電泳特征也完全壹樣。本質上是免疫球蛋白或其片段(輕鏈、重鏈等。).因為它是由單克隆產生的，所以經常出現在多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥和惡性淋巴瘤患者的血液或尿液中，所以被稱為M蛋白。這些M蛋白大多沒有抗體活性，所以也叫副蛋白。
m-白蛋白血癥可分為惡性和不明兩類。惡性M蛋白血癥多見於多發性骨髓瘤(包括輕鏈病)、巨球蛋白血癥、重鏈病、7SIg M病(Solomen -Konkel病)、半分子病和不完全骨髓瘤蛋白病(C端基因缺陷)。意義未明的單克隆丙種球蛋白病(M GUS)可分為兩種，壹種是伴有其他惡性腫瘤(如惡性淋巴瘤)，另壹種稱為良性M G US。
M蛋白的檢測方法主要有瓊脂或瓊脂糖電泳、免疫電泳、免疫固定電泳和選擇性免疫電泳。
二、M蛋白的鑒定
1.多發性骨髓瘤和巨球蛋白血癥患者M蛋白的檢測和鑒定
(1)血清總蛋白定量分析。90%患者血清總蛋白含量升高(70%患者> 100 g/L)，約10%患者正常甚至偏低(如輕鏈病)。
(2)血清蛋白醋酸纖維膜或瓊脂糖電泳。M蛋白在電泳上有典型的單株峰(也叫M帶)，特點是窄而粗的帶，掃描時峰尖。γ區高寬比≥2，β區高寬比≥1。由於Ig的不同，這個M帶可以出現在γ ~ α 2的任何區域。M蛋白增殖的另壹個特點是其他區。
條帶明顯減少，顯示的圖像更簡單。有時候有些患者的血M蛋白不高，這是突變細胞的Ig分泌能力決定的。這種患者血清的M峰在電泳時不明顯，容易被其他蛋白覆蓋，需要稀釋血清，用免疫固定電泳等其他敏感方法檢測。
(3)血清免疫球蛋白定量。壹般屬於M蛋白的Ig含量顯著升高，其他Ig正常或顯著降低。
(4)免疫電泳。
①正常人血清免疫電泳結果:可區分20多種蛋白質成分。陽極端有壹條船形粗沈澱線，為白蛋白。通常Ig成分在陰極端附近，離加樣孔最近的是Ig M，其次是IgA和IgG，形成平滑連續的沈澱線。
②多發性骨髓瘤:多發性骨髓瘤可分為IgG、IgA、Ig M、IgI)和IgE5五種類型。IgG和IgA進壹步分為亞類，所有Ig輕鏈進壹步分為兩種。因此，免疫電泳中變形沈澱線的位置隨每個分子的電泳帶而異，可從慢γ ~ β 2區出現。IgG 1多出現在慢γ區，IgG 4在β ~ α區。
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面積。m蛋白與相應的抗重鏈血清和抗輕鏈血清形成致密的沈澱弧，遷移範圍非常有限。由於該患者血清中Ig含量較高，在免疫擴散過程中可能存在抗原絕對過量而無沈澱線。這時候就需要稀釋血清重做，往往可以得到滿意的效果。③巨球蛋白血癥:由於IgM分子的增殖。在免疫電泳中，常出現以下特征:壹是沈澱線明顯變形。壹般情況下，IgM形成短的沈澱線，不容易看到變形。當IgM大量出現時，整個IgM沈澱線會變形。第二，抗原孔周圍和沿電泳縱軸有塊狀沈澱。第三，電泳過程中不存在Ig M成分的遷移，這多是由於IgM分子的聚合和電泳的不動造成的。
(5)尿蛋白的檢測。
①定性檢測:采用熱沈澱法和磺基水楊酸法。
②免疫電泳:濃縮尿液後，進行免疫電泳。大多數多發性骨髓瘤和輕鏈疾病患者僅有壹條密集、拱形和彎曲的沈澱線。60% ~ 80%的骨髓瘤患者和幾乎所有輕鏈疾病患者均可通過該方法檢出。
③輕鏈白蛋白-戊二醛交聯免疫電泳:多發性骨髓瘤、華氏巨球蛋白血癥、輕鏈病可為陽性，正常人為陰性。該方法對尿中柱鞘蛋白的檢出率為100%，假陽性率為4%。當尿液含200 μ g/ml時，可出現陽性結果。
2.重鏈病M蛋白的檢測與鑒定
像多發性骨髓瘤，免疫電泳中重鏈分子比Ig分子小，所以遷移性更快，電泳位置更靠近陽極側(β ~ α)。但重鏈病壹般需要通過免疫電泳來確診。
3.7乙狀結腸病中m蛋白的檢測和鑒定
壹般Ig M為五聚體，沈降系數為19S，而7S IgM患者的IgM為單體，沈降系數為7S。證明7S Ig M有兩種方法:壹種是在確定Ig M總量後，將1 ~ 2 ml血清過Sepharose 6B柱，然後根據洗脫峰圖用面積儀測量7S Ig M占總Ig M的百分比，與Ig M總量換算，得到7S IgM的絕對值。另壹種方法是植物血凝素的選擇性電泳(PHA)。這種方法的原理是五聚體Ig M能與PHA結合形成沈澱，而單體IgM不與PHA結合。在瓊脂凝膠中加入PHA並進行電泳後，五聚體Ig M被P H A截留，而7S Ig M繼續向陽極遊去，並能與後來加入抗體槽的Ig M抗血清反應形成單壹沈澱弧。