酵母單雜交
原理
酵母單雜交（yeast one hybrid）是在酵母雙雜交的基礎上發展起來的技術，主要用於研究蛋白質和DNA元件之間的相互作用。
真核生物基因的轉錄起始需轉錄因子參與，轉錄因子通常由壹個DNA特異性結合功能域和壹個或多個其他調控蛋白相互作用的激活功能域組成，即DNA結合結構域（DNA-bindingdomain BD）和轉錄激活結構域（activationdomain，AD）。用於酵母單雜交系統的酵母GAL4蛋白是壹種典型的轉錄因子，GAL4的DNA結合結構域靠近羥基端，含有幾個鋅指結構，可激活酵母半乳糖苷酶的上遊激活位點（UGS），而轉錄激活結構域可與RNA聚合酶或轉錄因子TFⅡD相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這壹過程中，DNA結合結構域和轉錄激活結構域可完全獨立地發揮作用。據此，我們可以將GAL4的DNA結合結構域置換為轉錄因子編碼基因，將順形作用元件與基本啟動子（minimal promoter, Pmin）和報告基因連接。只要轉錄因子能與目的DNA元件相互作用，即可通過轉錄激活結構域激活RNA聚合酶，啟動子下遊報告基因的轉錄。