從洋金花提取東莨菪堿方法？
壹、實驗目的
l、通過本實驗掌握生物堿的壹般提取分離方法。
2、掌握氧化鋁柱色譜分離莨菪堿和東莨菪堿的實驗方法，從而了解柱色譜的壹般實驗操作技術。
3、了解東莨菪堿和莨菪堿的檢識方法。
二、實驗原理
洋金花中的主要化學成份
l、東食著堿(Scopolamine)又名：莨菪胺、天仙子堿mp59℃(壹水合物)。
2、莨菪堿（Hyoscyamine）又名：天仙子胺mp108.5℃
3、莨菪酸（Tropic acid） mp118℃
4、去甲莨菪堿（Norhyoscyamine） mp142℃
5、曼陀羅堿（Meteloidine） mp141℃
本實驗是利用遊離生物堿及其鹽均能溶於乙醇的性質，用乙醇回流提取總生物堿，再利用東莨菪堿和莨菪堿堿性強弱不同，與堿性氧化鋁吸附力強弱不同，用氧化鋁柱色譜進行分離。
三、實驗內容
(壹)提取總堿：取洋金花粗粉50克，置1000毫升園底燒瓶中加95％乙醇300毫升，置水浴上回流提取1小時，傾出提取液，藥渣再用95％乙醇200毫升不浴回流提取30分鐘，傾出提取液，藥渣再用95％乙醇200毫升回流提取30分鐘，傾出提取液，三次提取液合並，用玻璃漏鬥過濾，濾液回收乙醇至無醇味，濃縮液加1％鹽酸l00毫升使溶解，抽濾，濾液用氯仿(40，20，20毫升)萃取脂溶性雜質，酸水液用10％NaOH調至pH9壹l0用氯仿萃取(60，50，30，20毫升)四次，氯仿液用無水硫酸鈉脫水幹燥，回收氯仿得總堿。
(二)莨菪堿與東莨菪堿的分離
這兩種生物堿我們用堿性氧化鋁幹柱色譜進行分離，其操作步驟如下：
1、裝柱：將色譜柱垂直固定在鐵支架上，柱底填壹塊棉花，打開活塞，稱取100—120目堿性氧化鋁40克，經漏鬥慢慢裝入柱中，壹邊裝填，壹邊用橡皮塞輕輕敲擊色譜柱，使其裝填均勻緊密，最後使吸附劑表面形成壹水平面。
2、上樣：將上述所得總生物堿用少量氯仿溶解，用吸管小心將氯仿溶液加在吸附劑表面上，切勿破壞吸附劑平面，為了防止平面被損壞，可剪壹直徑同色譜柱內徑大小壹樣的濾紙，小心放在吸附劑平面上，或在其上面加1—2厘米厚的石英砂，把氯仿溶液加到濾紙片上或石英砂上。
3、展開(洗脫)：加樣完畢，立即小心加入氯仿(也應註意防止破壞吸附劑平面)，展開洗脫，當溶劑前沿到達柱底部時，用50毫升錐形瓶收集洗脫液，並控制流速，使每分鐘流出液為60壹80滴，每瓶收集50毫升，更換錐形瓶，編上序號，並在柱上經常添加氯仿，使溶劑面始終高於吸附劑表面，東莨菪堿先洗脫下來，莨菪堿後洗脫下來。
4、溶劑回收，按序號分別回收溶劑後，再氧化鋁薄層檢查，以氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)展開，改良碘化鉍鉀試劑顯色。相同部分合並。
(三)檢識反應及薄層檢查
1、生物堿沈澱反應
分別取東莨菪堿，莨菪堿少量，置白瓷板中蒸發到幹，加2滴稀HCl溶解，
分別加以下生物堿沈澱試劑：
(1)碘—碘化鉀試液
(2)改良碘化鉍鉀試液
(3)苦味酸試液
觀察結果：
2、Vitali反應：分別取東莨菪堿和莨菪堿少量，置於白瓷板中，加發煙硝酸5滴，於水浴上蒸幹，放冷後，加10％KOH乙醇溶液2—3滴，觀察顏色變化，並加以解釋。
3、薄層色譜
吸附劑：堿性氧化鋁150壹180目，幹法鋪板。
展開劑：氯仿—丙酮—乙醇(8：2：1)
樣品：東莨菪堿氯仿溶液
莨菪堿氯仿溶液
東莨菪堿標準品
莨菪堿標準品
顯色劑：改良碘化鉍鉀，噴灑
四、實驗說明及註意事項
l、裝柱還可采用濕法：將洗脫劑加到吸附劑中，攪拌成稀糊狀，加到層析柱中，使吸附劑依重力自然下沈到柱底部，打開活塞使洗脫劑流出，但要保證溶劑表面始終高於吸附劑表面。幹法裝柱操作簡便、迅速、不受洗脫劑的限制，但柱效不高。
2、柱色譜和薄層色譜用的氧化鋁要註意活度，壹般Ⅱ—Ⅲ級即可，活度不夠就不能將樣品中成分分開。