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流式細胞儀檢測原理

流式細胞儀檢測原理如下:

流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的壹系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,並可以根據預選的參量範圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是壹種零分辨率的儀器,它只能測量壹個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標。

經特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出熒光供收集檢測。常用的光源有弧光燈和激光;激光器又以氬離子激光器為普遍,也有配和氪離子激光器或染料激光器。光源的選擇主要根據被激發物質的激發光譜而定。汞燈是最常用的弧光燈,其發射光譜大部分集中於300~400nm,很適合需要用紫外光激發的場合。

樣品分選原理。

流式細胞儀的分選功能是由細胞分選器來完成的。總的過程是:由噴嘴射出的液柱被分割成壹連串的小水滴,根據選定的某個參數由邏輯電路判明是否將被分選,而後由充電電路對選定細胞液滴充電,帶電液滴攜帶細胞通過靜電場而發生偏轉,落入收集器中;其它液體被當作廢液抽吸掉,某些類型的儀器也有采用捕獲管來進行分選的。

充電電壓壹般選+150V,或-150V;;偏轉板間的電位差為數千伏。充電電路中的充電脈沖發生器是由邏輯電路控制的,因此從參數測定經邏輯選擇再到脈沖充電需要壹段延遲時間,壹般為數十ms。