提取血清遊離DNA壹般用什麽試劑盒
操作步驟:
、體積全血操作步驟: <400ul全血300ul血液處理量例
1、向300ul抗凝劑血液加入2.5倍體積Solution A顛倒混勻12000rpm離1鐘棄掉清
2、再重復步驟1棄掉清
3、按照第3頁附表配制Solution B與Solution C混合液(Solution B與Solution C使用量見附表)
4、加入150ul混合液用移液器吹打均勻60℃水浴或孵箱孵育10鐘孵育期間顛倒混勻溶液由紅色變黃綠色或棕色
5、加入等體積異丙醇充顛倒混勻至現絲狀或絮狀基組DNA12000prm離1鐘棄掉清
6、加入800ul 75%酒精顛倒數;12000prm離1鐘用移液器吸掉清室溫幹燥10~15鐘
7、加入150ul Elution buffer60℃孵育10~15鐘或夜溶解DNA用移液器吹打均勻-20℃保存基組DNA
二、量全血操作步驟: 1~10ml血量3ml血液處理量例
1、向3ml抗凝劑血液加入2.5倍體積Solution A顛倒混勻3000rpm離5鐘棄掉清
2、再重復步驟1棄掉清
3、按照第3頁附表配制Solution B與Solution C混合液(Solution B與Solution C使用量見附表)
4、加入1.5ml混合液用1ml移液器或者性塑料吸管吹打均勻60℃水浴或孵箱孵育10鐘孵育期間顛倒混勻溶液由紅色變黃綠色或棕色
5、加入等體積異丙醇充顛倒混勻至現絲狀或絮狀基組DNA
6、用移液器絮狀物移加800ul 75%酒精1.5ml EP管顛倒數12000prm離3鐘棄掉清室溫幹燥10~15鐘
7、加入500ul Elution buffer60℃孵育10~15鐘或夜溶解DNA用移液器吹打均勻-20℃保存基組DNA
三、量全血操作步驟: 10~20ml血量10ml血液處理量例
1、向10ml抗凝劑血液加入2.5倍體積Solution A顛倒混勻8000rpm離5鐘棄掉清;
2、再重復步驟1棄掉清
3、按照第3頁附表配制Solution B與Solution C混合液(Solution B與Solution C使用量見附表);
4、加入5ml混合液用性塑料吸管吹打均勻60°C水浴或孵箱孵育10鐘孵育期間顛倒混勻溶液由紅色變黃綠色或棕色
5、加入等體積異丙醇充顛倒混勻至現絲狀或絮狀基組DNA;
6、用移液器絮狀物移加800ul 75%酒精1.5ml EP管顛倒數12000prm離1鐘棄掉清室溫幹燥10~15鐘;
7、加入1000ul Elution buffer60℃孵育10~15鐘或夜溶解DNA用移液器或性塑料吸管吹打均勻-20℃保存基組DNA