Western blot 中Tween-20的作用是什麽？應該怎麽用

1、Tween-20是壹種非離子型表面活性劑。用途為水包油乳化劑、可用作溶劑、擴散劑、穩定劑、潤滑劑和抗靜電劑等。氣相色譜固定液(最高使用溫度120℃)分離分析揮發油、脂肪酸酯、醇、酮和鹵化物。

2、Tween-20有復性抗原的作用，可提高特異性的識別能力。在做western blot時，用惰性蛋白質或非離子去汙劑封閉膜上的未結合位點可以降低抗體的非特異性結合。

封閉劑應該封閉所有未結合位點而不替換膜上的靶蛋白、不結合靶蛋白的標位、也不與抗體或檢測試劑有交叉反應。

3、Tween20清除去汙劑，而且濃度不要超過0.3%（0.05%效果最好），如果牛奶封閉效果不好可以提高吐溫濃度。

在WB洗液裏的吐溫是和BSA壹樣，對抗原抗體蛋白提供保護作用，同時因為是表面活性劑（司盤加成親水的環氧乙烷基團後的化合物），可以減少抗體對抗原的非特異性作用，用於洗脫未結合的抗體、減少非特異性結合。

Tween-20是我們用TBST的時候Tween-20的用量是0.5ml/L，不加SDS。

擴展資料

Western Blot壹般指蛋白質印跡法

它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的壹種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。

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