瓊脂糖凝膠電泳的常見濃度是
瓊脂糖凝膠電泳原理;
瓊脂糖凝膠電泳是分離和鑒定DNA和RNA分子混合物的常用方法。這種電泳方法以瓊脂凝膠為支撐,利用DNA分子在遊動過程中的電荷效應和分子篩效應,達到分離混合物的目的。
DNA分子在高於其等電點的溶液中帶負電荷,並在電場中向陽極移動。在壹定的電場強度下,DNA分子的遷移速度取決於分子篩效應,即分子本身的大小和構型是主要影響因素。DNA分子的遷移速度與其相對分子量成反比。
不同構型的DNA分子遷移速度不同。例如,壹個環狀DNA分子樣本,其中有三種分子構型:閉環超螺旋分子(cccDNA)、開環分子(ocDNA)和線性DNA分子(IDNA)。這三種不同構型的分子在電泳過程中的遷移速度順序為CCCNA > IDNA > OCDNA。
核酸分子是兩性解離分子,pH3.5是堿基上的氨基解離,三個磷酸基團中只有壹個解離,所以分子帶正電,在電場中向負極遊去。然後呢。在pH8.0-8.3時,堿基幾乎不可分,而磷酸基團遊離,所以核酸分子帶負電,在電場中向正極遊去。
不同核酸分子的電荷密度幾乎相同,所以對遊泳速度影響不大。中性或堿性時,單鏈DNA的遷移率幾乎與相同長度的雙鏈DNA相同。