“微生物檢驗”形態學檢驗對細菌鑒定的導航作用
細菌鑒定的原則之壹是以最少的試驗次數完成鑒定。細菌形態學檢查是最基本、簡單、快速的常規鑒定方法。細菌形態學包括細菌細胞形態學和細菌菌落形態學。細菌形態的正確描述取決於方法、培養基、培養時間、染色試劑等。不同的培養基和培養時間會影響細菌的形態。以下是我對形態學檢查對細菌鑒定導航作用的認識。歡迎閱讀。
1群體特征觀察
細菌在固體培養基表面生長形成菌落。菌落的描述應包括菌落大小(分為大、中、小三種，以1mm為界)、形狀、高度、邊緣、表面狀態、密度(透明度)、硬度(用接種環刮取菌落時的感覺)、內部結構、顏色、光澤、對培養基表面的粘附情況，以及菌落的溶血、臭味、產色素情況。觀察菌落特征的目的是初步鑒定細菌。有些特征是某些細菌所特有的，具有屬或種的鑒定價值。例如羊血瓊脂平板上肺炎鏈球菌的臍窩菌落(如圖1)、放線桿菌菌落的特殊內部結構(如圖2)、侵蝕艾肯的帽子樣菌落、斯氏假單胞菌的皺紋樣菌落、變形桿菌的遷移性菌落、銅綠假單胞菌的水溶性色素、卟啉菌的脂溶性色素(如圖3)和粘質沙雷氏菌的紅色色素(如圖4)。金黃色葡萄球菌產生吲哚產生的吲哚氣味、嗜血桿菌產生的鼠洞氣味、諾卡氏菌產生的腐土氣味、厭氧菌產生的腐氨氣味、熒光假單胞菌產生的黃色熒光素、部分厭氧菌產生的磚紅色熒光素等。有些細菌在氣體的影響下產生色素(粘質沙雷氏菌在厭氧環境下不產生顏色)，有些細菌在光的影響下產生色素(有些快速生長的分枝桿菌由亮或暗產生顏色)。
細菌菌落特征的觀察和描述是細菌鑒定的第壹步，其主要目的體現在以下幾個方面。
1.1致病菌的定量或半定量在對標本進行定量或半定量接種後，通過菌落計數即可得出定量或半定量結果。細菌的定量分析在尿液分析和療效動態觀察中具有臨床意義，半定量適用於開放標本的結果分析(確定優勢菌)。
1.2更有可能確定開放的病原菌標本被炎癥組織周圍的皮膚和粘膜的共同菌群汙染。觀察培養結果時，應根據直接塗片鏡檢結果和菌落形態特征確定致病菌。
1.3在解讀血培養鏡檢結果和分析陽性血培養瓶轉移結果時，應結合陽性培養液直接塗片鏡檢結果。如果塗片結果與培養結果不壹致，應考慮操作失誤或汙染。
1.4根據不同培養基上菌落的形態特征，結合革蘭氏染色鏡檢和快速輔助試驗(氧化酶、過氧化氫酶、凝固酶等)的結果確定鑒定方向。)，可以確定識別方向。
2細菌形態觀察
革蘭氏染色細胞形態學是細菌分類學的基礎。臨床微生物實驗室仍然使用細胞形態學的方法來鑒定細菌。掌握細胞形態學的標準方法可以為準確鑒定細菌提供可靠的保證。觀察和描述細菌細胞的形態特征是細菌鑒定的第二步，其主要目的體現在以下幾個方面。
2.1說明培養結果，確定鑒定方向。無論是液體培養(如血液培養、標本直接增菌培養)還是固體培養(瓊脂平板接種)，都要對培養物進行塗片染色，以確定培養物的性質，這樣可以快速報告，為下壹步的鑒定指明方向。圖5顯示了血培養陽性培養物塗片的革蘭氏染色的顯微結果。
2.2鑒別細菌的手段細菌的形態結合菌落的形態特征可以鑒別細菌。例如，通過塗片顯微鏡很容易區分生長在選擇性巧克力平板(含萬古黴素)上的草綠色溶血性菌落是乳桿菌還是腸球菌(VRE)。鮑曼不動桿菌的菌落形態與克雷伯氏菌相似，區別在於前者為革蘭氏陰性球菌(接近球菌)，後者為革蘭氏陰性桿菌；丹毒在血平板上的菌落形態與綠色鏈球菌非常相似，但在顯微鏡下又有很大不同。圖6顯示了革蘭氏染色顯微鏡下丹毒的形態學。
2.3鑒定方向和試劑選擇的依據葡萄球菌和鏈球菌、革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陽性桿菌、革蘭氏陰性球菌和革蘭氏陰性桿菌的鑒定方向都不壹樣，鑒定試劑的選擇也不壹樣。
2.4藥敏組合的選擇根據CLSI文獻，每種細菌都有壹定的抗菌藥物組合可供選擇。為了準確選擇藥敏組合，必須有準確的細胞形態學結果支持。
3種細菌特殊結構的觀察
3.1莢膜是細胞壁外被某些細菌包裹的壹層粘液。不同的細菌有不同的莢膜成分，壹般由多糖、肽或蛋白質組成。莢膜作為細菌的毒力因子進行觀察是必要的，但莢膜染色對臨床標本分離菌株的鑒定價值不大。圖7顯示了大腸桿菌莢膜染色的結果。
3.2鞭毛觀察細菌鞭毛對細菌鑒定有重要價值。根據鞭毛的位置和數量，細菌可分為極鞭毛、雙鞭毛、更新世鞭毛、周鞭毛和側鞭毛。鞭毛是細菌的動力器官。大多數情況下，細菌鞭毛的存在可以通過動態試驗來驗證，但動態試驗不能代替鞭毛染色進行細菌鑒定。圖8顯示霍亂弧菌鞭毛染色的結果。
3.3孢子形態包括孢子形狀、孢子位置和孢子囊膨大。孢子的形狀可分為圓柱形、橢圓形和球形，孢子的位置可分為末端、近端、中間或近中間。根據孢子的形態，可以鑒別出芽孢桿菌和梭菌。芽染法不優於革蘭氏染色法，相差顯微鏡觀察孢子優於芽染法和革蘭氏染色法。圖9顯示了艱難梭菌孢子的染色結果。
3.4異染顆粒主要由多聚磷酸鹽組成，隨菌齡延長可變大。聚磷酸鹽顆粒對某些染料有特殊反應，導致與所用染料不同的顏色，因此得名異染顆粒。如果用甲苯胺藍和亞甲基藍染色，就不是藍色而是紫色。棒狀桿菌和壹些芽孢桿菌經常含有這種異染顆粒。白喉棒狀桿菌的異染顆粒位於細胞兩端，故又稱極體，有助於該菌的鑒定。圖10顯示白喉棒狀桿菌異染顆粒染色的結果。
綜上所述，臨床微生物實驗室的細菌常規鑒定離不開形態學檢查。很難想象革蘭氏染色和形態學檢查錯誤會得到正確的鑒定結果。形態學檢查在細菌鑒定中起著重要的作用。導航？作用，具有重要價值，臨床微生物檢驗工作者應重視。
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