細胞培養的生長條件是什麽？
1.所有與細胞接觸的設備、裝置和溶液必須保持絕對無菌，以避免被細胞外微生物汙染。
目前最可靠、最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
如:玻璃制品、布制品、金屬制品:6.8kg20min。
橡膠制品:3.6 ~ 4.5公斤10分鐘。
培養液，如漢克斯液，水解乳蛋白:3.6 ~ 4.5 kg 10 min。
實驗中受感染的物品和動物屍體:20min 6.8kg。
試管、吸管等。，可以幹熱滅菌；
所有不適合加熱滅菌的液體，如合成培養液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液，均可過濾滅菌。
細胞培養中常用消毒劑的濃度及其應用場合
2.必須有充足的營養供給，絕對不能有有害物質，包括極微量的有害離子。因此，必須註意設備的清潔和配液用水的質量。
細胞培養對水的質量要求很高(見水處理)。
3.保證適量的氧氣供應。
細胞代謝需要空氣，否則細胞會死亡。在培養瓶中進行靜態培養或在旋轉瓶中進行旋轉培養時，只要培養液的量不超過總容量的30%，就可以通過在液面與空氣進行交換來保證細胞有足夠的氧氣。當在罐中進行深層培養時，通風是必要的。通常使用含5% CO2的空氣，或者根據需要將CO2、N2、O2和空氣以不同的比例混合。氧氣過多也不利於細胞的生長。
4.細胞代謝中產生的有害產物要隨時清除。
在代謝過程中，細胞會產生大量的代謝廢物，如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等。這些產物對細胞的生存有害，必須及時清除。在少量培養中，當培養基中的酚紅指示劑呈黃色時，說明已經產生了相當數量的乳酸，需要及時更換新鮮培養基。在大規模培養中，需要隨時測定葡萄糖和乳酸的含量，調整灌註速度，使代謝產物保持在無害的水平。
5.有良好的適合其生存的外部環境，包括溫度、酸堿度、滲透壓和離子濃度。
不同的細胞對pH的要求不同，壹般來說，適合細胞生長的pH為6.8 ~ 7.4。過高或過低都不利於細胞生長。如上所述，細胞在代謝過程中會產生大量的乳酸，使培養物的pH值降低。為了維持培養基的pH值，常常在培養基中加入各種緩沖體系，如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3(CO2)、三甘氨酸、Hepes溶液(常用濃度為10 ~ 50mol/L)。
6.及時接種以保持適當的細胞密度(見細胞傳代)。
第二，細胞分離
1.人白細胞的分離。
常用於制備IFN-α和γ。
主要來源於獻血者的靜脈血，也來源於體外循環時的殘血、分娩時的臍帶血、脾臟和扁桃體。
2.人胚胎肌層細胞的分離。用於制備幹擾素-β。
3.體外細胞年齡的計算
二倍體細胞年齡的計算是將細胞群體加倍，以每個培養容器細胞群體中的細胞數為基礎，每加倍壹次視為壹代，即1瓶細胞轉移到2瓶(1: 2種子率)後滿瓶視為壹代；1瓶到4瓶(1: 4)是第二代；1瓶和8瓶(1: 8)是三代。生產細胞的年齡限於細胞壽命的前2/3。
傳代細胞系以壹定的稀釋倍數傳代，每次傳代為壹代。根據各細胞系的實際經驗數據，保證細胞的質量和安全，確定生產和使用的最後限制代細胞。
四。細胞識別試驗
新建立的細胞系或品系、細胞庫和生產末期的細胞應被鑒定為該細胞。可采用遺傳特征、DNA指紋、染色體標記、免疫學、HLA和生化方法(如同工酶)進行判定，可選擇其中任何壹種。也可以采用簡單、可鑒別的方法，但需經國家藥品檢驗機構批準。
人二倍體細胞系來源於正常人胎肺或其他組織，主要用於培養病毒和制備疫苗。
1.細胞株要求
人類二倍體細胞系應按照以下要求進行全面檢測。
(1)細胞系的建立必須具備以下信息
用於建立細胞系的胎兒的胎齡和性別，以及終止妊娠的原因。
用於建立細胞系的胎兒父母的年齡、職業和健康狀況(由醫生證明)，胎兒父母三代應無明顯遺傳缺陷史。在提取胎兒組織前，應進行詳細的調查。
原始組織的類型，原始細胞培養的細胞數量和生長狀態。
細胞培養方法、歷史、生長特性和世代壽命。
細胞生長液的成分。