如何辨別花粉的好壞
表7蜂花粉分級的質量指標
表7蜂花粉分級質量指數(續)-1
註:碎骨料指數指基層采集時的限值。
檢驗方法分為感官檢驗和理化檢驗。
(1)感官測試
用眼睛或放大鏡觀察,聞壹聞,嘗壹嘗,根據花粉的顏色、狀態、氣味和味道進行判斷。
①雜質測定
購買時,目測無明顯雜質。將手插入蜂花粉包裝袋,手指向後彎曲,慢慢從袋中提出。手指上沒有沙子和細土,說明比較純凈。或者準確稱取約100g蜂花粉樣品,放入搪瓷盤中,挑出雜質稱重,用以下公式計算雜質:
雜質=雜質重量(克)/樣品重量(克)×100%
②單個花粉團率的測定。
也稱計數法,即從蜂花粉包裝中隨機取出幾克蜂花粉,用手數100,挑出蜜源植物的蜂花粉顆粒,按以下公式計算:
單個花粉團率=該蜜源植物的蜂花粉團(粒)數/蜂花粉團(粒)總數×100%。
當根據顏色難以區分蜂花粉顆粒的品種時,可以用顯微鏡檢驗其區別。
③水分測定
也稱為烘幹。準確稱取約10g蜂花粉樣品,置於已幹燥至恒重的培養皿或鋁盤中,樣品厚度約5mm。放入電吹風幹燥箱中,105℃幹燥2-4小時後取出,放入烘幹機中,冷卻至室溫後稱重。在相同溫度下重復幹燥約65438±0小時,直到重量恒定(兩次重量之差小於2 mg)。根據以下公式計算:
水分=B-C/B-A×100%
其中A為培養皿的重量(克),B為樣品和培養皿的重量(克),C為B達到恒重時的重量(克)。平行試驗結果的允許誤差為0.4%。
④顆粒破碎的測定。
稱取約50克蜂花粉樣品,用20目篩篩出破碎的顆粒和粉末,稱重,用下列公式計算:
破碎顆粒=篩分後的破碎顆粒重量(g)/蜂花粉樣品重量(g) ×100%
⑤蛋白質測定。
凱氏定氮法平行實驗結果的允許誤差為0.6%。
試劑:
濃硫酸(分析純)
硫酸銅和硫酸鉀混合試劑:稱取含5個結晶水的硫酸銅3g和硫酸鉀9g,放入研缽中,混合均勻,磨細。
田氏混合指示劑:吸取50毫升0.1%亞甲藍乙醇溶液和200毫升0.1%甲基紅乙醇溶液,混合搖勻,貯存於棕色瓶中。
2%硼酸溶液:稱取2g硼酸,加入約50 ~ 60ml蒸餾水溶解並稀釋至100ml,搖勻,然後滴加田氏混合指示劑,搖勻至溶液呈紫色。
0.1 mol/L鹽酸標準溶液:量取9 ml濃鹽酸,加蒸餾水稀釋至1000 ml,搖勻。
校準:準確稱取0.15g在270 ~ 300℃幹燥至恒重的標準無水碳酸鈉,置於150ml錐形瓶中,加50ml蒸餾水溶解,滴加2滴田氏混合指示劑,用上述鹽酸溶液滴定至溶液由綠色變為紫色,按下式計算鹽酸的摩爾濃度(m):
M=W/V×0.106
式中,V為鹽酸溶液消耗的體積(ml);
W——無水碳酸鈉的重量(g)。
將0.1 mol/L鹽酸溶液用蒸餾水稀釋10倍,得到0.01 mol/L鹽酸標準溶液(使用前配制)。
40%氫氧化鈉溶液。
儀器設備:1/10000天平、消化管、容量瓶、錐形瓶、移液管、25ml滴定管、量筒、壹套凱氏半微量蒸餾裝置、調溫遠紅外消化電爐。
測定步驟:
消化:準確稱取約50 ~ 60mg磨細混勻的蜂花粉樣品,置於消化管中,加入300g硫酸鉀和硫酸銅混合試劑和3ml濃硫酸,將消化管插入調溫遠紅外消化器的孔中,接通電源,在通風櫃中消化,待消化液清澈亮綠色時消化完成(消化時間約1小時)。
蒸餾:消化液冷卻後,定量轉入蒸餾器,用少量蒸餾水沖洗消化管數次,洗滌液並入蒸餾器。在蒸餾器中加入11 ~ 12 ml的40%氫氧化鈉溶液後,加入5 ml蒸餾水(壹半流入蒸餾器,另壹半密封在玻璃中),用調溫電爐開始蒸餾,用裝有10 ml的2%硼酸溶液的錐形瓶吸收蒸餾釋放的氮氣,直至錐形瓶中溶液的顏色由紫紅色變為紅色。
滴定:用0.01 mol/L鹽酸標準溶液滴定錐形瓶中吸收的氨量,直至溶液由綠色變為紫紅色,按下式計算:
蛋白質(%)=(va-VB)×m×0.014×6.25/w×100。
式中,VA——滴定樣品消耗的鹽酸標準溶液的毫升數;VB——滴定空白消耗的鹽酸標準溶液的毫升數;
M——鹽酸標準溶液的摩爾濃度;
W——稱取樣品的克數;
0.014-1毫克氮;
6.25——氮轉化為蛋白質的系數。
⑥維生素C的測定:
用2,6-二氯苯酚靛酚鈉鹽滴定法,平行試驗結果的允許誤差為0.3 mg /100 g。
試劑:
2%草酸溶液。
標準維生素C溶液:準確稱取約20 mg維生素C(分析純),置於100 ml容量瓶中,用2%草酸溶液稀釋至刻度,搖勻(使用前配制)。
2,6-二氯酚靛酚鈉溶液:稱取約50毫克2,6-二氯酚靛酚鈉(分析純),溶於50毫升熱蒸餾水中,冷卻,定量轉移至250毫升容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,置棕色瓶中,冷藏。
校準:準確吸取標準維生素C溶液2ml,加入2%草酸溶液5ml,用2,6-二氯苯酚靛酚鈉溶液滴定至粉紅色,終點為15s不褪色。根據已知的標準維生素C溶液和2,6-二氯酚靛酚鈉溶液的用量,按下式計算1毫升2,6-二氯酚靛酚。
W=A×2/V
其中W-1毫升2,6-二氯苯酚靛酚鈉溶液相當於毫克維生素C;
a——1毫升維生素C標準溶液中維生素C的毫克數;
V——滴定2毫升維生素C標準溶液所消耗的2,6-二氯酚靛酚鈉溶液的毫升數。
15%亞鐵氰化鉀溶液。
30%醋酸鋅溶液。
儀器:壹套真空過濾裝置、托盤扭秤和普通玻璃器皿。
測定步驟:
樣品制備:準確稱取約10g蜂花粉樣品,置於研缽中,加入少許2%草酸溶液研磨,定量轉移至100ml容量瓶中,將2%草酸溶液稀釋至刻度,加入幾毫升15%亞鐵氰化鉀溶液,再加入幾毫升30%醋酸鋅溶液(直至溶液不沈澱)。
滴定:準確吸取10 ml樣品溶液,置於錐形瓶中,用2,6-二氯苯酚靛酚鈉溶液滴定至呈粉紅色,終點為15秒不褪色。記下2,6-二氯酚靛酚鈉溶液的毫升數,按下式計算:
w =(V-V 1)×N/b×b/a×100
其中w-100g蜂花粉樣品含維生素C毫克;
V1——滴定空白消耗的2,6-二氯苯酚靛酚鈉溶液的毫升數;
N-1毫升2,6-二氯苯酚靛酚鈉溶液相當於毫克維生素C;
B——滴定所取樣品溶液的毫升數;
A——樣品的克數;
B——樣品溶液的總毫升數。
⑦灰分測定:
儀器:1/10000分析天平、高溫爐、坩堝。
測定步驟:準確稱取約10g蜂花粉樣品,放入恒重坩堝中,在105℃烘箱中幹燥至近恒重,300℃灼燒至完全碳化,移入高溫爐中,600℃灼燒至完全灰化,冷卻至200℃以下,放入幹燥器中,冷卻至室溫,準確稱取至。使用以下公式計算結果:
灰分(%)=W2-W3/W1-W3×100
其中w 1-坩堝和樣品的重量(g);
w2-坩堝和灰分的重量(g);
W3——燒至恒重的坩堝重量(g)。
平行試驗的允許誤差為0.3%。
⑧過氧化氫酶測定-氣體法;
儀器:徐-胡型氣體容積法蜂花粉活性檢測儀。
試劑:
3%過氧化氫溶液:將30%過氧化氫溶液稀釋10倍。
測定步驟:
將清水倒入水浴至產氣管架,打開電源,調節溫控器至指示燈亮度最大。當水溫升至38℃時,調節溫控器關閉指示燈,待水溫保持在37℃5分鐘後再使用。
準確稱取約0.5g蜂花粉樣品,置於小燒杯中,加入65438±0ml蒸餾水,用圓形玻璃棒將蜂花粉團研磨成均勻的蜂花粉水懸浮液。
用帶三通閥的5 ml產氣管吸盡蜂花粉水懸液,除去空氣,關閉閥門,置於37℃水浴中10分鐘(簡稱A管)。
用另壹根產氣管吸取5ml的3%過氧化氫溶液,排除空氣,關閉閥門,置於37℃水浴中10分鐘(簡稱B管)。
10分鐘後,將A管和B管從水浴中取出,打開B管閥門排除空氣,連接A管和B管之間的接口,然後從B管向A管註入1 ml過氧化氫溶液,關閉閥門,將A管放入37℃的水浴中,同時記錄2分鐘後的產氣量(ml)
過氧化氫酶單位= 1268× V。
式中1268——37℃時1毫升氧氣的重量(微克);
v——37℃時1g蜂花粉1min產生的氧氣體積(ml)。
平行試驗結果的允許誤差為50個過氧化氫酶單位。