金黃色葡萄球菌的檢驗
(1)血漿凝固酶試驗:血漿凝固酶是金黃色葡萄球菌所產生的,與其致病力有關的壹種侵襲性酶,其作用是使血漿中的纖維蛋白在菌體表面沈積和凝固以阻礙吞噬細胞的吞噬。血漿凝固酶分為結合型和遊離型。前者結合在細菌的細胞壁上,能直接作用於血漿中的纖維蛋白原,使之轉化為纖維蛋白,環繞菌體而形成凝塊。而遊離型血漿凝固酶則在產生後被分泌到菌體外,不能直接作用於纖維蛋白原,但可以激活血漿凝血酶原,使之轉化成凝血酶,後者再作用於纖維蛋白原使其轉化為纖維蛋白。具體的測量方法也因此分為玻片法和試管法兩種。
玻片法將待試菌落乳化於玻片上的鹽水中,經10~20S證實無自凝後,用接種環取人或兔血漿壹環,與乳化菌液混合,出現凝集者為陽性,另設生理鹽水為陰性對照。
試管法吸取0.5mL兔血漿與0.5mL金黃色葡萄球菌肉浸液肉湯24小時培養物充分混勻,置37℃培養,每隔半小時觀察壹次,連續觀察6小時,出現凝固,即將小試管傾斜或倒置時,內容物不流動,判為陽性。
(2)耐熱核酸酶試驗:將24小時肉湯培養物沸水浴處理15min,用接種環劃線刺種於甲苯胺蘭-DNA平板,35℃培養24小時,在刺種線周圍出現淡粉色者為陽性。本試驗金黃色葡萄球菌為陽性。
(3)甘露醇發酵實驗金黃色葡萄球菌可發酵甘露醇。
(4)Staphaurex 膠乳凝集實驗是鑒定金黃色葡萄球菌的壹種快速、簡便的商品化直接凝集試驗。其基本原理是在紙片上滴加包被有纖維蛋白原和IgG抗體的聚苯乙烯膠乳,然後用接種環挑取待鑒定菌株的新鮮培養物加入混勻,若出現凝集塊現象即為陽性。
5. 生化鑒定如上述,註意與其他凝固酶陽性的葡萄球菌的鑒別要點:PYR(吡咯烷酮-β-萘基酰胺試驗陰性;VP試驗陽性;鳥氨酸脫羧酶試驗陰性。
6. 免疫學方法用酶聯免疫吸附試驗和對流免疫電泳方法可檢測金葡菌的磷壁酸抗體。
7. 分子生物學方法包括PFGE脈沖場凝膠電泳以及酶切圖譜分析等。