瓊脂糖電泳檢測質粒dna有哪些現象?
DNA分子在瓊脂糖凝膠中遊動時具有電荷效應和分子篩效應。DNA分子在等電點以上的pH溶液中帶負電荷,在電場中移動到正極。由於糖-磷酸骨架的重復結構,相同數目的雙鏈DNA的凈電荷幾乎相同,因此它們可以以相同的速度向正極移動。在壹定的電場強度下,DNA分子的遷移速度取決於分子篩效應,即DNA分子本身的大小和構型。相對分子量不同的DNA片段,遊動速度不同,可以分離。DNA分子的遷移速度與相對分子質量的對數值成反比。凝膠電泳不僅可以分離相對分子量不同的DNA,還可以分離相對分子量相同但構型不同的DNA分子。比如上次實驗提取的pUC19質粒有三種構型:超螺旋共價閉合環狀質粒DNA(CCCNA);開環質粒DNA,即* *價閉環質粒DNA 1鏈斷裂,(開環DNA,oc DNA);簡稱);線性質粒DNA的兩條鏈,即化合價為* * * *的閉合環狀質粒DNA斷裂(線性DNA,縮寫為L DNA)。這三種構型的質粒DNA分子在凝膠電泳中的遷移率是不同的。所以電泳後有三條帶,超螺旋質粒DNA遊得最快,其次是線性DNA和開環質粒DNA。