瓊脂的作用是提供培養基。
瓊脂
瓊脂是固體培養中最好的固體制劑。它的主要作用是固化液體培養基。有報道提到用濾紙、玻璃球、玻璃棉、石英砂、蛭石、明膠、矽膠、丙烯酰胺、泡沫,甚至南瓜、土豆來代替瓊脂。然而,直到現在,還沒有找到比瓊脂更方便、更好的支持物。對了,瓊脂本身不提供任何營養。它是壹種高分子碳水化合物,從紅藻等藻類中提取,只溶於熱水成為溶膠,冷卻後(40℃以下)凝固成固體凝膠。所謂“煮沸”培養基,就是將瓊脂溶解在熱水中(90℃以上)。
瓊脂的用量壹般在4-10/1之間。新買的瓊脂要先做凝固能力測試。壹般只要能穩定凝固就行,不要多加。平時培養室溫度低的時候可以少放壹點,溫度高的時候要多放壹點。瓊脂顏色淺,透明幹凈。最近有廠家生產瓊脂粉,比長條方便。同壹廠家的產品往往用粉比用條少。在避免“玻璃化”時,瓊脂的用量往往會增加。
添加瓊脂制成的固體培養基具有操作簡單、易於支撐、培養通風等優點。便於定期觀察和研究。但也有壹些缺點,如培養物在培養基中接觸(即吸收)面積小,營養物質和激素在瓊脂中擴散慢,擴散速度不壹,使營養物質補充緩慢,成分比例發生變化。同時,培養物排出的壹些代謝廢物高濃度聚集在吸收表面,抑制了組織的代謝活性。此外,瓊脂不可避免地含有雜質,這使得培養物在固體培養基中的生長速度明顯低於液體培養基。
瓊脂的凝固能力不僅與原料、生產廠家的加工方式有關,還與高壓滅菌時的溫度、時間、pH值等因素有關。長時間的高溫會降低凝固能力,過多的酸堿結合高溫會使瓊脂水解,但如果存放過久,瓊脂就會變成褐色,逐漸失去凝固能力。